诊断和科研试剂—NADPH简介

导读:尚科生物医药(上海)有限公司

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NADPH是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)中与腺嘌呤相连的核糖环系2'-位的磷酸化衍生物,参与多种合成代谢反应,如脂类、脂肪酸和核苷酸的合成。这些反应中需要NADPH作为还原剂、氢负离子的供体,NADPH是NADP+的还原形式。

NADPH的形成有两种主要途径:①NADH和NADP+通过质子转运NAD(P)+转氢酶 (NNT) 产生NADPH;②NADPH由不同的酶通过多种途径产生的,包括oxPPP中的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)和6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-PGD);胞质和线粒体异柠檬酸脱氢酶(IDHc和IDHm);胞质和线粒体苹果酸酶(MEc和MEm);谷氨酸脱氢酶;叶酸代谢中的亚甲基四氢叶酸脱氢酶(MTHFD)和醛脱氢酶 (ALDH)。

线粒体酶产生的NADPH主要有助于线粒体抗氧化和生物合成,是哺乳动物细胞内最重要的还原性物质。NADPH的主要生物学功能包括:维持细胞抗氧化防御系统,是谷胱甘肽系统、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶等的辅酶;作为电子供体参与脂肪酸、类固醇和DNA还原合成;参与能量代谢;维持昼夜节律等。

NADPH也可作为NADPH氧化酶家族蛋白 (NOX1-7) 的底物产生ROS,在多种生理和病理过程中起关键作用。在炎症通路中,NADPH作为中性粒细胞和吞噬细胞中NOX的底物,通过产生超氧化物来杀死病原体。NADPH还可以通过一氧化氮合酶产生活性氮,显著促进蛋白硝基化应激。


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(NADPH结构式)


另外NADPH主要应用领域还包括体外诊断试剂、科研试剂领域,NADPH作为还原型辅酶Ⅱ可以配合多种诊断酶使用。作为诊断试剂盒的原材料,主要应用于生化诊断试剂盒和荧光定量检测试剂盒等等。

2019年浙江大学药学院药学信息研究所在biomedical chromatography期刊发表一篇“A simple and accurate method to determinenitrite and nitrate inserum based on highperformance liquid chromatography with fluorescencedetection”的研究文献。研究团队通过以NADPH 为辅因子的硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐,通过高效液相色谱荧光定量检测血清中硝酸盐的含量。该方法具有特异性好、灵敏度高、准确度和重现性好等优点,且操作简单,适用于大量血清样品中亚硝酸盐和硝酸盐的纳摩尔级定量测定。

NADPH在生化诊断试剂盒领域应用也很广泛,涉及酶类、肝功能、肾功能等检测试剂盒,反应体系中多数都会应用辅酶NADPH参与反应,加速反应速率,提升检测的灵敏度和精准度。如酶法测定血胺试剂盒,试剂盒用NADPH代替NADH为辅酶,缩短了反应时间,又可以减少假阳性反应。

随着体外诊断行业的快速发展,行业内针对精确诊断结果的要求越来越高,NADPH作为诊断科研试剂领域上游的主要原材料,对其品质、稳定性要求也随之越来越高。

NADPH早期均为进口,价格昂贵,供货周期长。尚科生物医药(上海)有限公司于2014年实现NADPH的开发并实现规模化生产,采用生物合成法,产品品质符合诊断和科研试剂的要求。

尚科生物医药(上海)有限公司成立于2007年,专注于生物酶的开发与应用研究,是国内最早实现辅酶NAD族产品国产化的公司。

尚科生物医药(上海)有限公司

尚科生物专注于生物酶的开发及其在医药工业中的应用研究,为企业提供生物催化解决方案;尚科生物是全球NMN/NAD/NADH等辅酶族产品的主要供应商之一;尚科生物开发的医药原料药和中间体产品包括依鲁替尼、克唑替尼、乐伐替尼等;尚科生物承担上海国际医学园区研发公共服务平台的管理与运行,可以为客户提供小分子研究的检测服务,包括NMR、LCMS、GCMS等项目。欢迎访问尚科生物官网:www.syncozymes.com。


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责任编辑:白芨


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