甘油是一种简单的多元醇，可以通过丙烯合成、油的水解、酵母发酵等方法生成，可用于合成药品、化妆品、食品、防冻剂等。与上述方法不同，本文介绍了一种以果糖-6-磷酸醛缩酶(FSA)和醛还原酶(ALR)为催化剂，利用甲醛（FALD）和乙醇醛（GALD）生成甘油的新方法，如图1所示：

①以FALD和GALD为底物生成L-甘油醛

本文选用的ALR来自于Candida tenuis的木糖还原酶(CtXR)和来自Hypocrea jecorina的DL-甘油醛还原酶 (HjGLD)。根据这两个酶的最佳反应条件和生成甘油的动力学常数（CtXR的kcat/Km值为11659.80±611.63 sec-1·M-1；HjGLD的kcat/Km值为7519.82±409.17 sec-1·M-1），确定在还原L-甘油醛为甘油的反应过程中，CtXR的活性比HjGLD高。

利用酶GaFSA和CtXR一锅法制备甘油能够产生6.3 mM的甘油，而利用两步法却能生成8.8mM的甘油。本文推测的原因有两个：第一个原因是CtXR和GaFSA的最佳反应条件不同，具体如表1所示，特别是一锅法中的pH值会影响产物的生成量；第二个原因是底物FALD和GALD对CtXR具有毒性，如图3所示。

表1. CtXR和GaFSA的最佳反应条件

图3. FALD和GALD对GaFSA (A)和CtXR (B)活性的影响